PCR實驗室又稱為基因擴增實驗室,是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統,能迅速掌握患者體內的病毒含量,其精確度高達納米級別,精確檢測乙肝病毒在患者體內存在的數量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據。
一、PCR實驗室基本結構
PCR實驗室基本由四大結構組成,常見為:試劑準備區、制備區、擴增區和擴增分析區。
二、基本功能介紹:
1、準備區:主要進行實驗所需試劑的準備工作,分裝等,由傳遞窗運送至制備區,嚴禁走人員通道。
2、制備區:主要進行樣品等保存,DNA/RNA的提取、貯存和其加入至擴增反應管和測定DNA/RNA的合成。
3、擴增區:主要進行DNA的擴增,已制備的DNA模版和合成的cDNA的加入和主板反應混合液制備成反應混合液等也可在擴增區內進行,在巢式PCR測定中,通常在首次擴增后必須打開反應管,因此巢式擴增有較高等污染危害性,二次加樣必須在本區完成。
4、擴增分析:主要用來做擴增產物的測定,本區是主要的擴增產物污染來源,因此必須主意避免通過本區的物品或者工作服將擴增產物帶出。
三、以上四個功能區順序為:準備➡️制備➡️擴增➡️分析,為了避免交叉污染,實驗區設計全排風、全新風系統要求,保持階梯性壓差(有正壓至負壓)。實現工藝、物品、人員、氣壓氣流單向流程保護。
四、PCR實驗室區域選擇建設材料:
墻面應選擇結構牢固,氣密性好,無死角,墻體易清潔易消毒,不積塵,耐腐蝕等特點。地面應選擇pvc卷材或環氧樹脂自流平耐腐蝕,易清潔材料。
五、試驗區儀器設備基本配置:
1、準備區:超凈臺、天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器等。
2、制備區:冰箱(-80)生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。
3、擴增:擴增儀、冰箱、離心機、加樣器等。
4、擴增分析區:酶標儀、洗板機、加樣器、水浴箱等。
5、實驗臺、試劑柜等配套設施:滿足耐腐蝕、抗細菌、潔凈等要求(一般常見材質為全鋼或不銹鋼)。
六、PCR實驗室沒有太嚴格的等級潔凈度要求,可根據多方面因素全面考慮。
以上就是
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